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目的:构建噬菌体抗体库并筛选抗黑素瘤细胞的人抗体.方法:从1例长期存活的黑素瘤患者的外周血中分离单个核细胞(PBMC),提取总RNA,并逆转录为cDNA.用PCR扩增多样性κ链基因和重链Fd段基因,分别构建κ链库和重链库,组合为Fab段噬菌体抗体库,用两种黑素瘤细胞系对抗体库进行筛选和鉴定.结果:所构建的噬菌体抗体库的库容量达1.2×108,用两种黑素瘤细胞系进行亲和吸附筛选,获得针对其中1种黑素瘤细胞系的特异性抗体.结论:采用噬菌体抗体库技术,成功地从1例长期存活的黑素瘤患者体内克隆到特异性抗黑素瘤细胞的抗体,为进一步的研究和应用奠定了基础.

作者:杨军;高天文;王刚;王雷;沈柱;李春英

来源:细胞与分子免疫学杂志 2004 年 20卷 5期

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作者:
杨军;高天文;王刚;王雷;沈柱;李春英
来源:
细胞与分子免疫学杂志 2004 年 20卷 5期
标签:
黑素瘤 抗体库 噬菌体表面展示技术
目的:构建噬菌体抗体库并筛选抗黑素瘤细胞的人抗体.方法:从1例长期存活的黑素瘤患者的外周血中分离单个核细胞(PBMC),提取总RNA,并逆转录为cDNA.用PCR扩增多样性κ链基因和重链Fd段基因,分别构建κ链库和重链库,组合为Fab段噬菌体抗体库,用两种黑素瘤细胞系对抗体库进行筛选和鉴定.结果:所构建的噬菌体抗体库的库容量达1.2×108,用两种黑素瘤细胞系进行亲和吸附筛选,获得针对其中1种黑素瘤细胞系的特异性抗体.结论:采用噬菌体抗体库技术,成功地从1例长期存活的黑素瘤患者体内克隆到特异性抗黑素瘤细胞的抗体,为进一步的研究和应用奠定了基础.