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目的:制备抗人甲胎蛋白(AFP)单克隆抗体(mAb),并用于制备抗体芯片.方法:利用杂交瘤技术建立能稳定分泌抗人AFP mAb的杂交瘤细胞株;对抗体的亲和力、特异性等特性进行分析;利用抗体相加实验,双抗体夹心ELISA、胶体金免疫层析实验以及抗体芯片技术对抗体表位及其配对情况进行分析研究.结果:共获得16株稳定分泌抗人AFP mAb的杂交瘤细胞株,从中筛选出多组性能优良的配对抗体,结合抗体芯片技术,最终筛选出适合制备抗体芯片的配对抗体.结论:当抗体包被材料或包被方法发生改变时,会引起mAb构象发生变化,从而影响抗体的配对效果.因此,筛选适合制备抗体芯片的配对mAb时,需要对mAb的特性进行综合分析,选取特异性好,亲和力高的mAb进行配对筛选.

作者:闫静辉;吴萌;程华;张小兵;李春生;李亚璞;陈英珠

来源:细胞与分子免疫学杂志 2007 年 23卷 9期

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作者:
闫静辉;吴萌;程华;张小兵;李春生;李亚璞;陈英珠
来源:
细胞与分子免疫学杂志 2007 年 23卷 9期
标签:
抗体芯片 AFP 抗体筛选 夹心ELISA
目的:制备抗人甲胎蛋白(AFP)单克隆抗体(mAb),并用于制备抗体芯片.方法:利用杂交瘤技术建立能稳定分泌抗人AFP mAb的杂交瘤细胞株;对抗体的亲和力、特异性等特性进行分析;利用抗体相加实验,双抗体夹心ELISA、胶体金免疫层析实验以及抗体芯片技术对抗体表位及其配对情况进行分析研究.结果:共获得16株稳定分泌抗人AFP mAb的杂交瘤细胞株,从中筛选出多组性能优良的配对抗体,结合抗体芯片技术,最终筛选出适合制备抗体芯片的配对抗体.结论:当抗体包被材料或包被方法发生改变时,会引起mAb构象发生变化,从而影响抗体的配对效果.因此,筛选适合制备抗体芯片的配对mAb时,需要对mAb的特性进行综合分析,选取特异性好,亲和力高的mAb进行配对筛选.