目的:通过精原干细胞体外转染外源基因获得转基因精子.方法:孵化16 d的鸡胚睾丸,酶消化获取精原干细胞(SSCs),纯化后体外培养和传代扩增,碱性磷酸酶(AKP)活性和胚胎阶段特异性抗原(SSEA-1)免疫荧光鉴定.电穿孔介导EGFP转染SSCs,G418筛选8 d后将阳性SSCs移植入经白消安处理的实验鸡体内.结果:移植后25 d采集实验鸡精液检测,精子密度为3.87(10~(10)/L),表达EGFP的成熟精子比率为4.25
作者:陈昊;孙敏;高元丰;余飞;孙国波;田智泉;杨海燕;任丽伟;李碧春
来源:细胞与分子免疫学杂志 2009 年 25卷 10期