目的:构建ureI和ctB-ureI真核表达质粒并分析其在细胞的表达情况.方法:用pIRES-RD2真核表达载体分别在5'端连接ureI和ctB-ureI基因,经双酶切和测序鉴定正确后,相应质粒用脂质体转染HEK293T细胞,用荧光显微镜观察荧光标签,确定质粒的转染率;用人抗幽门螺旋杆菌抗体和马抗CtB抗体,采用免疫荧光和免疫酶组织化学等方法研究该两种真核表达质粒在细胞中目的蛋白表达情况.结果:成功构建了ureI和ctB-ureI的真核表达质粒pIPES-RD2-ureI和pIRES-RD2-ctB-ureI,用此质粒转染HEK293T细胞48~72 h后,荧光显微镜显示该两种质粒的转染率约为80
作者:王保宁;杨远;邝玉;曹康;李明远;李婉宜
来源:细胞与分子免疫学杂志 2010 年 26卷 8期