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目的:克隆ZNF185基因并检测ZNF185在小鼠睾丸中的定位.方法:从小鼠睾丸中提取RNA,经RT-PCR,再对目的片段进行克隆和鉴定;提取小鼠肝、睾丸与卵巢组织的蛋白质,进行Western blot分析;制备小鼠睾丸冰冻切片,应用免疫荧光技术分析.结果:(1)ZNF185基因克隆完全正确.(2)Western blot显示,睾丸中的ZNF185含量最多.(3)免疫荧光显示,ZNF185定位于睾丸间质细胞和精子,在睾丸间质细胞表达较弱,而在圆形精子和成熟精子高表达.结论:成功克隆了ZNF185基因,并初步探明了ZNF185在小鼠睾丸中的定位.

作者:潘智芳;冯卫国;陈丽梅;刘晓影;赵春玲;连波;于文静;高志芹

来源:细胞与分子免疫学杂志 2010 年 26卷 10期

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作者:
潘智芳;冯卫国;陈丽梅;刘晓影;赵春玲;连波;于文静;高志芹
来源:
细胞与分子免疫学杂志 2010 年 26卷 10期
标签:
ZNF185 基因克隆 Western blot 免疫荧光
目的:克隆ZNF185基因并检测ZNF185在小鼠睾丸中的定位.方法:从小鼠睾丸中提取RNA,经RT-PCR,再对目的片段进行克隆和鉴定;提取小鼠肝、睾丸与卵巢组织的蛋白质,进行Western blot分析;制备小鼠睾丸冰冻切片,应用免疫荧光技术分析.结果:(1)ZNF185基因克隆完全正确.(2)Western blot显示,睾丸中的ZNF185含量最多.(3)免疫荧光显示,ZNF185定位于睾丸间质细胞和精子,在睾丸间质细胞表达较弱,而在圆形精子和成熟精子高表达.结论:成功克隆了ZNF185基因,并初步探明了ZNF185在小鼠睾丸中的定位.