目的:H2-Bl基因转染小鼠血管平滑肌细胞(VSMC),观察其凋亡、增殖和抗外周血单个核细胞(PBMC)杀伤性等生物学行为的变化,探讨借鉴母胎免疫耐受模型防治心脏移植术后免疫排斥反应的机制.方法:0.5 mg/L空质粒、0.5 mg/L H2-Bl质粒、1.0mg/L H2-Bl质粒转染小鼠血管平滑肌细胞后,采用实时荧光定量PCR、流式细胞术、酶标仪检测不同时间质粒的转染效率、H2-Bl基因mRNA的表达量、转染VSMC的凋亡与增殖情况以及PBMC对靶细胞的毒性作用.结果:荧光定量PCR结果显示,基因组的H2-Bl基因mRNA表达量明显高于对照组(P<0.001).H2-Bl基因促进VSMC凋亡,转染24 h后0.5 mg/L H2-Bl质粒组、1.0 mg/LH2-Bl质粒组与空白对照比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).H2-Bl基因抑制VSMC增殖,转染24 h和48 h后0.5 mg/L H2-Bl质粒组、1.0 mg/L H2-Bl质粒组与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).细胞毒性试验在转染24 h后,0.5 mg/L H2-Bl质粒组、1.0mg/L H2-Bl质粒组细胞毒性均较空白对照明显降低(P<0.05,P<0.01).结论:pEGFP-N1-H2Bl质粒载体转染小鼠VSMC后,能够有效促进其凋亡,抑制其增殖,降低PBMC对靶细胞的毒性作用,诱导免疫耐受.
作者:陈丽;李立元;徐一君;李红芳;邓勇志;边云飞;马捷
来源:细胞与分子免疫学杂志 2011 年 27卷 2期