目的:制备人B组轮状病毒WH-2株、vp7基因的单克隆抗体(mAb), 并研究其免疫学特性.方法:将B组轮状病毒WH-2株vp7基因克隆至pGEX-KG载体, 然后转入大肠杆菌E. coli Top10, IPTG诱导表达GST-VP7融合蛋白.分离纯化蛋白GST-VP7并免疫BALB/c小鼠, 取其脾细胞与骨髓瘤细胞sp2/O融合, 利用间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞, 有限稀释法克隆化, 获得稳定分泌mAb检测为阳性的细胞株.结果:经过3次克隆化筛选, 最终得到l株能和GST-VP7蛋白反应稳定分泌mAb的阳性细胞克隆, 这些mAb通过Western blot鉴定结果显示其具有良好的特异性.结论:人B组轮状病毒WH-2株VP7蛋白成功在大肠杆菌中GST融合表达及mAb的制备体能用于GBRV结构和功能的研究, 也为其引起的疾病预防、诊断和治疗等研究和临床诊断奠定了基础.
作者：丛文娟；杨继红；邓妍；陈凯峰；郭建军；熊国梅；刘中来
来源：细胞与分子免疫学杂志 2011 年 27卷 3期
