目的 建立小鼠系膜细胞(MC)的分离、培养及鉴定的方法.方法 采用分样筛法分离出肾小球、通过优生选择法进行系膜细胞原代培养.相差显微镜、HE染色、扫描电镜、透射电镜观察小鼠系膜细胞的结构,免疫荧光细胞化学技术鉴定原代系膜细胞,血管紧张素Ⅱ刺激MC观察生物学特性.CCK-8法确定细胞生长曲线.结果 原代培养的肾小球经20~30 d系膜细胞逐渐铺满皿底.传代后MC一般6~10h贴壁,第2~3天进入指数增殖期,第3~5天进入平台期.α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)抗体免疫荧光染色阳性,nephrin抗体间接免疫荧光阴性.血管紧张素Ⅱ刺激15 min后,系膜细胞明显收缩.结论 成功建立了小鼠系膜细胞的分离、培养及鉴定的方法体系.
作者:曹英杰;郭乃凤;吕莹;施辉;陈晓岚
来源:细胞与分子免疫学杂志 2013 年 29卷 12期