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目的 研究人胸腺球蛋白(TG)在临床治疗级培养体系中,对细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)增殖、免疫细胞表型和细胞毒作用的影响.方法 分离11例健康正常人外周血单个核细胞(PBMC),γ干扰素预处理;1d后,TG或CD3 mAb刺激;随后,每3d补充IL-2等添加物,培养至21 d.台盼蓝拒染法计数细胞总数和活力;流式细胞术分析CD3、CD4、CD8、CD16/CD56和NK细胞活化/抑制受体表达情况以及CD25+ Foxp3+调节T细胞(Treg)的变化;乳酸脱氢酶释放法检测细胞毒活性.结果 TG和CD3 mAb均能刺激CIK细胞生长,但CD3 mAb作用弱于TG.培养7d,2组CIK细胞中,CD3+ CD16+ CD56+细胞、CD3-CD16+ CD56+细胞及NK细胞活化/抑制受体表达均出现一过性减少;培养14 d,开始恢复,并持续增加至21 d;在7d、14 d和21 d等3个检测点,CD3 mAb组的三者均低于TG组(P<0.05),而且,细胞毒活性也低于TG组.值得注意的是,培养7d,Treg一过性增加,且TG组明显高于CD3 mAb组(P<0.05);另外,在整个培养期间,2组CIK细胞中,CD3+ CD4+细胞持续减少,而CD3+ CD8+细胞在7d,即迅速增加,并维持该水平至21 d,这种改变在2组间无差异.结论 TG能选择性地促进CIK细胞中主要效应细胞增殖、分化和成熟,提高其细胞毒活性,因此,其具有替代CD3 mAb用于制备临床级CIK细胞制品的可行性;CD3 mAb和T

作者:陈伟;蔺迪;姜志明;杨紫恩;宋爽;周季安;周丽;孙英慧;于卉影

来源:细胞与分子免疫学杂志 2014 年 30卷 7期

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作者:
陈伟;蔺迪;姜志明;杨紫恩;宋爽;周季安;周丽;孙英慧;于卉影
来源:
细胞与分子免疫学杂志 2014 年 30卷 7期
标签:
细胞因子诱导的杀伤细胞 免疫治疗 人胸腺球蛋白 cytokine-induced killer cells immunotherapy thymoglobulin
目的 研究人胸腺球蛋白(TG)在临床治疗级培养体系中,对细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)增殖、免疫细胞表型和细胞毒作用的影响.方法 分离11例健康正常人外周血单个核细胞(PBMC),γ干扰素预处理;1d后,TG或CD3 mAb刺激;随后,每3d补充IL-2等添加物,培养至21 d.台盼蓝拒染法计数细胞总数和活力;流式细胞术分析CD3、CD4、CD8、CD16/CD56和NK细胞活化/抑制受体表达情况以及CD25+ Foxp3+调节T细胞(Treg)的变化;乳酸脱氢酶释放法检测细胞毒活性.结果 TG和CD3 mAb均能刺激CIK细胞生长,但CD3 mAb作用弱于TG.培养7d,2组CIK细胞中,CD3+ CD16+ CD56+细胞、CD3-CD16+ CD56+细胞及NK细胞活化/抑制受体表达均出现一过性减少;培养14 d,开始恢复,并持续增加至21 d;在7d、14 d和21 d等3个检测点,CD3 mAb组的三者均低于TG组(P<0.05),而且,细胞毒活性也低于TG组.值得注意的是,培养7d,Treg一过性增加,且TG组明显高于CD3 mAb组(P<0.05);另外,在整个培养期间,2组CIK细胞中,CD3+ CD4+细胞持续减少,而CD3+ CD8+细胞在7d,即迅速增加,并维持该水平至21 d,这种改变在2组间无差异.结论 TG能选择性地促进CIK细胞中主要效应细胞增殖、分化和成熟,提高其细胞毒活性,因此,其具有替代CD3 mAb用于制备临床级CIK细胞制品的可行性;CD3 mAb和T