目的 研究小鼠神经母细胞瘤Neuro-2a(N2a)细胞中脑啡肽酶(NEP)基因表达的表观调控机制,探讨DNA甲基化与组蛋白乙酰化之间的相互作用.方法 体外培养N2a细胞,以3μmol/umol/L、5μmol/L DNA甲基化酶抑制5-氮杂脱氧胞苷(5-Aza-dc)及(300、500、700) nmol/L组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)分别处理N2a细胞48 h和24 h.采用逆转录PCR(RT-PCR)、Western blot法分别检测NEP的mRNA、蛋白表达;亚硫酸氢盐测序聚合酶链反应(BSP)法检测NEP基因启动子区DNA的甲基化水平;染色质免疫共沉淀(ChIP)法检测NEP基因启动子区组蛋白H3的乙酰化水平.结果 5-Aza-dc和TSA均能剂量依赖地提高NEP基因的表达(P＜0.01);5-Aza-dc可诱导NEP基因去甲基化(P＜0.01);TSA可增高NEP组蛋白H3乙酰化水平(P＜0.05),但不能明显改变NEP基因DNA的甲基化水平(P＞0.05).结论 在小鼠神经母细胞瘤N2a细胞中NEP基因的表达受DNA甲基化及组蛋白乙酰化的调控,组蛋白乙酰化水平并不影响DNA甲基化状态.
作者：邓钰双；卢茜；刘莉；李涛；张玉平；郭秀明；余刚
来源：细胞与分子免疫学杂志 2014 年 30卷 8期
