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目的 探讨结核分枝杆菌耐热抗原(MTB-HAg)和抗T细胞受体γδ单克隆抗体(TCRγδ mAb)在刺激人γδT细胞诱导分化产生IL-17中的作用.方法 健康人外周血单个核细胞经过免疫磁珠分选得到纯化的γδT细胞后,加入MTB-HAg或包被的TCRδ mAb,再加或不加CD28 mAb进行刺激,同时加或不加IL-17极化细胞因子组合(CK)(IL-1β、IL-6、TGF-β和IL-23),极化诱导培养10~12 d.然后收集诱导极化培养的γδT细胞,经佛波醇酯和离子霉素再刺激6h后,用ELISPOT法检测产生IL-17的细胞数.结果 经刺激和诱导分化培养的γδT细胞用ELISPOT法检测产生IL-17的细胞数发现,TCRγδ mAb联合CK组与TCRγδ mAb组相比明显增加,TCRγδ mAb联合CD28 mAb组与TCRγδ mAb同时联合CD28 mAb和CK组相比明显减少.TCRγδ mAb同时联合CD28 mAb和CK组与TCRγδ mAb联合CK组相比明显增多.MTB-Hag同时联合CD28 mAb和CK组与TCRγδ mAb同时联合CD28 mAb和CK组相比显著减少,但与MTB-HAg联合CD28 mAb组相比明显增多.结论 诱导Th17分化的CK(IL-1β、IL-6、TGF-β和IL-23)也能诱导人γδT细胞分化产生IL-17,TCRγδ mAb刺激γδT细胞增殖后诱导分化产生IL-17的活性比MTB-HAg更强.另外,CD28在TCRδ mAb激活γδT细胞诱导产生IL-17的过程中也有重要作用.

作者:陈立;夏惠;汪洪涛;盛玲玲;徐志庆;孙垚;唐洁;李柏青

来源:细胞与分子免疫学杂志 2015 年 31卷 2期

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作者:
陈立;夏惠;汪洪涛;盛玲玲;徐志庆;孙垚;唐洁;李柏青
来源:
细胞与分子免疫学杂志 2015 年 31卷 2期
标签:
结核分枝杆菌 耐热抗原 γδT细胞 IL-17 Mycobacterium tuberculosis heat-resistant antigen γδT cell IL-17
目的 探讨结核分枝杆菌耐热抗原(MTB-HAg)和抗T细胞受体γδ单克隆抗体(TCRγδ mAb)在刺激人γδT细胞诱导分化产生IL-17中的作用.方法 健康人外周血单个核细胞经过免疫磁珠分选得到纯化的γδT细胞后,加入MTB-HAg或包被的TCRδ mAb,再加或不加CD28 mAb进行刺激,同时加或不加IL-17极化细胞因子组合(CK)(IL-1β、IL-6、TGF-β和IL-23),极化诱导培养10~12 d.然后收集诱导极化培养的γδT细胞,经佛波醇酯和离子霉素再刺激6h后,用ELISPOT法检测产生IL-17的细胞数.结果 经刺激和诱导分化培养的γδT细胞用ELISPOT法检测产生IL-17的细胞数发现,TCRγδ mAb联合CK组与TCRγδ mAb组相比明显增加,TCRγδ mAb联合CD28 mAb组与TCRγδ mAb同时联合CD28 mAb和CK组相比明显减少.TCRγδ mAb同时联合CD28 mAb和CK组与TCRγδ mAb联合CK组相比明显增多.MTB-Hag同时联合CD28 mAb和CK组与TCRγδ mAb同时联合CD28 mAb和CK组相比显著减少,但与MTB-HAg联合CD28 mAb组相比明显增多.结论 诱导Th17分化的CK(IL-1β、IL-6、TGF-β和IL-23)也能诱导人γδT细胞分化产生IL-17,TCRγδ mAb刺激γδT细胞增殖后诱导分化产生IL-17的活性比MTB-HAg更强.另外,CD28在TCRδ mAb激活γδT细胞诱导产生IL-17的过程中也有重要作用.