目的 构建带myc标签的自噬标志蛋白P62基因真核表达载体,获得myc-p62融合表达蛋白,并对其功能进行初步检测.方法 利用聚合酶链式反应从乳腺文库中体外扩增人P62基因编码序列,将其与空pXJ-40-myc载体正确连接,重组质粒myc-p62转染HEK293T细胞,用Western blot法检测该融合蛋白的表达情况,并检测该蛋白对细胞外信号调节激酶(ERK)磷酸化的影响.结果 构建得到myc-P62基因的真核表达载体,双酶切鉴定得到与预期片段大小相符的外源性基因插入片段,经测序与目的序列完全一致;经Western blot法检测,融合蛋白成功表达,并能够抑制ERK磷酸化.结论 成功表达了myc-p62融合蛋白并能抑制ERK磷酸化.
作者：张云静；冯滢滢；张立；徐小洁；王涛；范忠义；叶棋浓；张蓉
来源：细胞与分子免疫学杂志 2015 年 31卷 5期
