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目的 分离脐带血单个核细胞并进行体外定向诱导培养,获得人源化、纯度高的成熟肥大细胞.方法 用重组人干细胞生长因子(rhSCF)、重组人白细胞介素6(rhIL-6)定向诱导从脐带血中分离的单个核细胞,使其分化成为成熟的肥大细胞.收集不同时间段的细胞,进行甲苯胺蓝染色并用流式细胞术检测其膜上FcεRⅠ受体,以鉴定其成熟程度.成熟的肥大细胞经过敏原激发后,检测细胞上清中的组织胺及类胰蛋白酶.结果 在加入rhSCF和rhIL-6诱导2周以后,肥大细胞即开始表达FcεRⅠ受体,诱导3周后达到高峰,同时细胞质内嗜碱性颗粒增多.诱导成熟后的细胞经过敏原激发后,能有效释放类胰蛋白酶和组织胺.结论 脐带血单个核细胞可定向诱导成为成熟的肥大细胞,可用于过敏原性的体外评价试验.

作者:陈惠芳;何颖;张兰珍;刘兆宇;邹泽红;陶爱林

来源:细胞与分子免疫学杂志 2015 年 31卷 9期

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作者:
陈惠芳;何颖;张兰珍;刘兆宇;邹泽红;陶爱林
来源:
细胞与分子免疫学杂志 2015 年 31卷 9期
标签:
脐血单个核细胞 肥大细胞 组织胺 类胰蛋白酶 human umbilical cord blood mononuclear cells mast cell histamine tryptase
目的 分离脐带血单个核细胞并进行体外定向诱导培养,获得人源化、纯度高的成熟肥大细胞.方法 用重组人干细胞生长因子(rhSCF)、重组人白细胞介素6(rhIL-6)定向诱导从脐带血中分离的单个核细胞,使其分化成为成熟的肥大细胞.收集不同时间段的细胞,进行甲苯胺蓝染色并用流式细胞术检测其膜上FcεRⅠ受体,以鉴定其成熟程度.成熟的肥大细胞经过敏原激发后,检测细胞上清中的组织胺及类胰蛋白酶.结果 在加入rhSCF和rhIL-6诱导2周以后,肥大细胞即开始表达FcεRⅠ受体,诱导3周后达到高峰,同时细胞质内嗜碱性颗粒增多.诱导成熟后的细胞经过敏原激发后,能有效释放类胰蛋白酶和组织胺.结论 脐带血单个核细胞可定向诱导成为成熟的肥大细胞,可用于过敏原性的体外评价试验.