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目的 探讨β2糖蛋白1(β2GP1)-抗β2GP1复合物诱导小鼠腹腔巨噬细胞表达肿瘤坏死因子α(TNF-α)中Toll样受体2(TLR2)的作用.方法 用β2GP1-抗β2GP1复合物、TLR2激动剂Pam3CSK4及TLR4激动剂脂多糖(LPS)、TLR2阻断剂抗小鼠TLR2-IgG(mTLR2-IgG)及TLR4阻断剂TAK-242对BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞进行体外处理.用实时荧光定量PCR检测TNF-αmRNA水平,Western blot法及免疫荧光细胞化学方法检测TNF-α蛋白表达;采用流式细胞术检测小鼠腹腔巨噬细胞表面TLR2的水平.结果 β2GP1-抗β2GP1复合物、Pam3 CSK4及LPS均能够显著增加BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞表达TNF-αmRNA及蛋白水平,抗mTLR2-IgG能够抑制上述刺激物促进细胞TNF-α表达的效应,但弱于TAK-242的抑制效应,抗mTLR2-IgG与TAK-242联合使用未显示更强的抑制效应.流式细胞术结果显示,β2GP1-抗β2GP1复合物、Pam3 CSK4及LPS均能增加小鼠腹腔巨噬细胞TLR2的表达,而抗mTLR2-IgG、TAK-242以及二者联合使用均未显示对TLR2表达的抑制效应.结论 TLR4、TLR2都增强β2GP1-抗β2GP1复合物对小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α的刺激作用.

作者:于尹婧;周红;夏龙飞;孔祥民;谢娅超;解鸿翔;何超;成思

来源:细胞与分子免疫学杂志 2016 年 32卷 4期

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作者:
于尹婧;周红;夏龙飞;孔祥民;谢娅超;解鸿翔;何超;成思
来源:
细胞与分子免疫学杂志 2016 年 32卷 4期
标签:
抗磷脂综合征 β2GP1-抗β2GP1复合物 Toll样受体2 小鼠腹腔巨噬细胞 肿瘤坏死因子α antiphospholipid syndrome β2GP1/anti-β2GP1 complex Toll-like receptor 2 mouse peritoneal macrophage tumor necrosis factor α
目的 探讨β2糖蛋白1(β2GP1)-抗β2GP1复合物诱导小鼠腹腔巨噬细胞表达肿瘤坏死因子α(TNF-α)中Toll样受体2(TLR2)的作用.方法 用β2GP1-抗β2GP1复合物、TLR2激动剂Pam3CSK4及TLR4激动剂脂多糖(LPS)、TLR2阻断剂抗小鼠TLR2-IgG(mTLR2-IgG)及TLR4阻断剂TAK-242对BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞进行体外处理.用实时荧光定量PCR检测TNF-αmRNA水平,Western blot法及免疫荧光细胞化学方法检测TNF-α蛋白表达;采用流式细胞术检测小鼠腹腔巨噬细胞表面TLR2的水平.结果 β2GP1-抗β2GP1复合物、Pam3 CSK4及LPS均能够显著增加BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞表达TNF-αmRNA及蛋白水平,抗mTLR2-IgG能够抑制上述刺激物促进细胞TNF-α表达的效应,但弱于TAK-242的抑制效应,抗mTLR2-IgG与TAK-242联合使用未显示更强的抑制效应.流式细胞术结果显示,β2GP1-抗β2GP1复合物、Pam3 CSK4及LPS均能增加小鼠腹腔巨噬细胞TLR2的表达,而抗mTLR2-IgG、TAK-242以及二者联合使用均未显示对TLR2表达的抑制效应.结论 TLR4、TLR2都增强β2GP1-抗β2GP1复合物对小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α的刺激作用.