目的 探讨低氧联合肿瘤坏死因子α(TNF-α)介导人肺微血管内皮细胞(HPMVEC)凋亡的信号通路.方法 低氧6、12、24h及(10、20、50、100) ng/mL TNF-α分别处理HPMVEC,使用MTT比色法检测各组的细胞活性;选用最佳的低氧时间及TNF-α剂量联合刺激HPMVEC,流式细胞术检测caspase-3的活性,异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexin Ⅴ-FITC/PI)检测各组细胞的凋亡情况,采用Western blot法检测各组细胞中磷酸化信号转导子与转录因子3(pSTAT3)及磷酸化胞外信号调节激酶1/2 (pERK1/2)的水平.结果 MTT法显示,低氧24h组的相对细胞活性最低,100 ng/mL TNF-α处理组的相对细胞活性明显降低且对细胞活性的抑制呈现剂量依赖性;选用低氧24h及100 ng/mL TNF-α作为联合处理组,与空白对照组及单独处理组相比,联合处理组的caspase-3活性及细胞凋亡率均升高.Western blot结果显示,与空白对照组相比,联合处理组的pSTAT3表达明显升高,而pERK1/2的变化无统计学意义.而STAT3通路阻断剂S3I-201可使联合处理组的细胞凋亡率下降.结论 低氧状态联合TNF-α通过激活STAT3而非ERK1/2介导HPMVEC凋亡.
作者：吉圣珺；温业良；赖其廷；李敏菁；张培芳
来源：细胞与分子免疫学杂志 2016 年 32卷 7期
