目的 监测在缺氧条件下进行枸杞多糖处理后肺血管平滑肌细胞中沉默接合型信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)及缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达.方法 血管平滑肌细胞分为常氧(200 mL/L O2)培养的正常细胞、2 μmol/mL枸杞多糖处理的常氧细胞、DMSO处理的常氧细胞、DMSO处理的缺氧(100 ml/L O2)细胞、(0.5、1、2) μmoL/mL枸杞多糖处理的缺氧细胞、SIRT1的特异性激动剂10 mol/L白芦藜醇处理的缺氧细胞、非特异性激动剂1 μmol/L SRT-1720处理的缺氧细胞、SIRT1抑制剂0.5 μmol/L EX-527处理的缺氧细胞,培养于6、12、24h,实时定量PCR、Western blot法分别检测SIRT1、MMP-9及HIF-1α的mRNA和蛋白表达;在缺氧的血管平滑肌细胞中加入枸杞多糖处理12 h,实时定量PCR、Western blot法分别检测血管平滑肌细胞中SIRT1、MMP-9及HIF-1 α的表达.结果 缺氧条件下血管平滑肌细胞SIRT1 mRNA和蛋白水平降低,MMP-9及HIF-1α mRNA和蛋白水平升高.缺氧条件下用枸杞多糖处理后,SIRT1的含量随枸杞多糖剂量的增加而增加,同时MMP-9、HIF-1α的含量降低.SIRT1的特异性激动剂白藜芦醇可抑制MMP-9的表达.结论 枸杞多糖增加缺氧肺血管平滑肌细胞SIRT1水平、降低MMP-9及HIF-1α的水平.
作者:朱燕妮;孙玉宁;关文霞;闫琰;张薇;白鲁根;孔海涛;李芳
来源:细胞与分子免疫学杂志 2016 年 32卷 7期