目的 验证miR-338-5p对核因子κB1(NF-κB1)水平的影响,研究其对B细胞生物学功能的调控作用.方法 利用双荧光素酶报告基因检测系统进行miR-338-5p靶基因的验证;采用抗IgM抗体和/或重组人B细胞活化因子(rhBAFF)蛋白刺激的B细胞培养体系,将miR-338-5p激动剂、miR-338-5p拮抗剂、NF-κB1小干扰RNA(siNF-κB1)及其对应的阴性对照制剂转染CD20κB淋巴细胞,利用实时定量PCR法检测各转染组NF-κB1 mRNA水平,Western blot法检测NF-κB1蛋白(p105、p50)的水平,ELISA检测培养上清中IgG含量.结果 靶基因验证实验显示,miR-338-5p模拟物与报告载体共转染组的hRluc/hLuc萤光素酶活力比值显著升高;体外培养实验结果显示,在抗IgM抗体与rhBAFF蛋白共培养体系,miR-338-5p激动剂转染组NF-κB1 mRNA、p105蛋白、p50蛋白、IgG水平均显著升高,siNF-κB1的作用与miR-338-5p激动剂相反;miR-338-5p拮抗剂转染组NF-κB1 mRNA、IgG水平均显著降低;相关性分析结果表明,NF-κB1 mRNA水平与IgG水平呈显著正相关.结论 miR-338-5p靶向正调控NF-κB1、间接作用于BAFF信号参与调控B细胞生物学功能.
作者：马旭怡；何小舟；董盼盼；薛冬；宋丹；徐海燕；张学光
来源：细胞与分子免疫学杂志 2016 年 32卷 11期
