目的 研究人乳头瘤病毒16 E5(HPV16 E5)蛋白对角质形成细胞生长因子(KGF)诱导的细胞自噬的影响.方法 构建HPV16 E5蛋白真核表达载体pCI-neo-E5,采用LipofectamineTM 2000转染至HaCaT人角质形成细胞,实时定量PCR检测HPV16 E5 mRNA转录水平.转染pCI-neo-E5并以KGF刺激HaCaT细胞后,实时定量PCR检测自噬相关蛋白beclin l、自噬相关基因5(ATG5)、ATG7及LC3B mRNA的水平,Western blot法检测LC3BⅡ蛋白的表达量,免疫荧光技术检测LC3B的分布.结果 成功构建HPV16 E5真核表达载体pCI-neo-E5并可有效表达.角质形成细胞转染pCl-neo-E5,自噬相关蛋白mRNA的水平显著降低,抑制KGF诱导的LC3BⅡ表达水平升高和LC3B的聚集.结论 HPV16 E5蛋白通过下调自噬相关蛋白的表达,抑制KGF诱导的细胞自噬.
作者：付广红；龚丹；万佳
来源：细胞与分子免疫学杂志 2016 年 32卷 11期
