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目的 探讨Wnt通路在记忆性T细胞(TM)增殖活化中发挥的调控作用.方法 建立同种异体(BALB/c-C57BL/6)小鼠皮肤移植模型,采用免疫磁珠方法分选培养C57 BL/6小鼠未成熟树突状细胞(imDC)、成熟树突状细胞(mDC)和TM,流式细胞术鉴定.在96孔板或TranswellTM中用imDC和负载BALB/c小鼠抗原的mDC与TM进行混合淋巴细胞反应(MLR).氚标记的胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)检测TM的增殖情况.ELISA检测培养上清中白细胞介素2(IL-2)、IL-10、γ干扰素(IFN-γ)的水平.实时定量PCR检测imDC和mDC中Wnt基因的表达情况.双荧光素酶报告基因检测MLR中TM的β联蛋白/T细胞因子(β-catenin/TCF)信号通路转录活性.结果 与对照组相比,在96孔板中负载BALB/c小鼠抗原的mDC显著诱导TM的增殖,上调IL-2和IFN-γ,下调IL-10的表达.mDC中Wnt3a和Wnt5a的mRNA表达水平显著高于imDC.mDC与TM共培养可显著增强TM的β-catenin/TCF信号通路转录活性.而在TranswellTM中培养的细胞基本未见细胞增殖.结论 负载供者抗原的受者小鼠mDC可通过直接接触的方式有效激活受者效应型TM的增殖,Wnt通路的β-catenin/TCF转录激活可能是介导TM活化增殖的重要信号通路.

作者:罗蕾;罗光恒;方茜;黄山;陈辉

来源:细胞与分子免疫学杂志 2016 年 32卷 12期

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作者:
罗蕾;罗光恒;方茜;黄山;陈辉
来源:
细胞与分子免疫学杂志 2016 年 32卷 12期
标签:
树突状细胞 记忆性T细胞 Wnt β联蛋白/T细胞因子(β-catenin/TCF)信号通路 dendritic cells memory T cells Wnt β-catenin/TCF signaling pathway
目的 探讨Wnt通路在记忆性T细胞(TM)增殖活化中发挥的调控作用.方法 建立同种异体(BALB/c-C57BL/6)小鼠皮肤移植模型,采用免疫磁珠方法分选培养C57 BL/6小鼠未成熟树突状细胞(imDC)、成熟树突状细胞(mDC)和TM,流式细胞术鉴定.在96孔板或TranswellTM中用imDC和负载BALB/c小鼠抗原的mDC与TM进行混合淋巴细胞反应(MLR).氚标记的胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)检测TM的增殖情况.ELISA检测培养上清中白细胞介素2(IL-2)、IL-10、γ干扰素(IFN-γ)的水平.实时定量PCR检测imDC和mDC中Wnt基因的表达情况.双荧光素酶报告基因检测MLR中TM的β联蛋白/T细胞因子(β-catenin/TCF)信号通路转录活性.结果 与对照组相比,在96孔板中负载BALB/c小鼠抗原的mDC显著诱导TM的增殖,上调IL-2和IFN-γ,下调IL-10的表达.mDC中Wnt3a和Wnt5a的mRNA表达水平显著高于imDC.mDC与TM共培养可显著增强TM的β-catenin/TCF信号通路转录活性.而在TranswellTM中培养的细胞基本未见细胞增殖.结论 负载供者抗原的受者小鼠mDC可通过直接接触的方式有效激活受者效应型TM的增殖,Wnt通路的β-catenin/TCF转录激活可能是介导TM活化增殖的重要信号通路.