目的 研究牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)对人牙龈成纤维细胞(HGF)自噬功能的影响.方法 以10μg/mLPs-LPS刺激HGF 12 h或24h,采用雷帕霉素作为阳性对照,Western blot法检测微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)的表达,间接免疫荧光技术检测自噬体的分布;同时使用MitoSOX Red荧光探针标记线粒体活性氧(mtROS)、间接免疫荧光法检测自噬体,观察Pg-LPS处理后HGF mtROS与线粒体自噬水平;分别以叔丁基-4-羟基茴香醚(BHA)、N-乙酰半胱氨酸(NAC)以及辅酶Q10(CoQ10)阻断ROS,Western blot法检测Pg-LPS刺激后LC3B的表达量.结果 Pg-LPS处理后LC3BⅡ/LC3B Ⅰ的比值与自噬体数量均显著升高,并且24h处理组高于12 h处理组,同时mtROS生成量与线粒体自噬均明显增加.此外CoQ10可有效降低Pg-LPS诱导的HGF自噬.结论 Pg-LPS在HGF中通过触发mtROS活化自噬,并且自噬参与受损线粒体的降解以维持细胞内环境稳态.
作者：刘瑜；李树锦；张森林；操小马；张艳梅
来源：细胞与分子免疫学杂志 2017 年 33卷 3期
