目的 探讨无血清培养人胎儿来源胎盘间充质干细胞(hfPMSC)旁分泌肝细胞生长因子(HGF)对脂多糖(LPS)诱导内皮细胞损伤的保护作用.方法 用无血清培养基培养MPMSC,流式细胞术检测CD73、CD90、CD105、CD14、CD34、CD45、HLA-DR的表达以确定其干细胞属性;利用TranswellTM共培养体系[人肺微血管内皮细胞(HPMEC)接种于TranswellTM上室,hfPMSC接种于下室],检测hfPMSC旁分泌HGF对LPS处理的HPMEC通透性的影响.实验分为LPS处理组、hfPMSC共培养组、HGF中和抗体组、正常HPMEC对照组.在TranswellTM培养上室加入100 μg异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(FITC-dextran),荧光酶标仪检测染料渗透情况;Western blot法检测渗透相关蛋白血管内皮钙黏素(VE-cadherin)和陷窝蛋白1(caveolin-1)及凋亡相关裂解型蛋白胱天蛋白酶3(c-caspase-3)和裂解型多腺苷二磷酸核糖聚合酶1(c-PARP1)的蛋白水平.结果 所培养细胞具备间充质干细胞形态,为CD73、CD90、CD105阳性及CD14、CD34、CD45、HLA-DR阴性细胞;与LPS处理组相比,hfPMSC共培养可显著抑制LPS环境中HPMEC的通透性,显著上调VE-cadherin的表达水平,降低caveolin-1、c-caspase-3和c-PARP1的蛋白水平.相反,中和共培养体系中的HGF,可逆转hfPMSC对HPMEC的上述作用.结论 hfPMSC通过分泌HGF抑制
作者:陶金;夏培哲;周瑜;李璐;卢震辉;杜勇;朱永朝
来源:细胞与分子免疫学杂志 2019 年 35卷 2期