目的 表达、纯化并鉴定抗人表皮生长因子受体3(HER3)的单链抗体(scFv).方法 从 NCBI查找抗 HER3单克隆抗体UM716的轻链和重链序列,构建抗HER3-scFv基因;利用毕赤酵母组成性表达载体pGAPZαA构建重组表达载体,电转化毕赤酵母,筛选高表达工程菌;工程菌发酵上清经疏水层析和金属离子亲和层析纯化,Weslem blot法和 ELISA鉴定纯化产物.结果 成功构建了抗 HER3-scFv基因,获得了高表达工程菌;发酵上清经两步层析纯化,获得了纯度达95％以上的抗 HER3-scFv,产率为 192mg/L;Western blot结果显示抗 HER3-scFv得到正确表达,ELISA结果表明抗 HER3-scFv可特异识别 HER3.结论 成功制备了特异的抗 HER3-scFv.
作者：刘梦苗；何佩彦；温碧燕；邱创楠；李黄金；赵林
来源：细胞与分子免疫学杂志 2019 年 35卷 10期
