目的 原核表达获得人乳头瘤病毒58型主要衣壳蛋白L1(HPV58 L1)并进行鉴定.方法 将HPV58 L1蛋白的重组表达菌pE-SUMO-58 L1(BI21)经IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE及Western blot法鉴定重组SUMO-58 L1蛋白的表达情况;经Ni柱纯化获得重组SUMO-58 L1蛋白,经泛素样蛋白酶1(ULP1)酶切去除SUMO标签获得重组HPV58 L1蛋白,红细胞凝集试验(HA)验证HPV58 L1蛋白活性;再将重组HPV58 L1蛋白免疫BALB/c小鼠,ELISA测定免疫血清效价,间接免疫荧光试验(IFA)检测免疫血清与HEK293T细胞瞬时表达的HPV58 L1蛋白的反应情况.结果 重组蛋白SUMO-58 L1在大肠杆菌中可溶性表达量较高,其相对分子质量(Mr)约72 000.经Ni-NTA亲和纯化后,再用ULP1去除SUMO标签最终得到Mr 约58 000的HPV58 L1蛋白,该重组蛋白具有类似于HPV病毒的凝集小鼠红细胞的血凝活性,其血凝价为1∶16.ELISA测定HPV58 L1蛋白免疫小鼠血清效价最高可达1∶10 240,且免疫血清可与HEK293T细胞瞬时表达的HPV58 L1蛋白发生特异反应.结论 经大肠杆菌表达系统成功获得了具有血凝活性的重组HPV58 L1蛋白,其免疫血清可用于免疫细胞化学检测真核细胞表达的HPV58 L1蛋白.
作者：陈玉梅；栗宁；薛明岩；周景明；祁艳华；殷佳佳；张雨晴；李昱雅；王爱萍
来源：细胞与分子免疫学杂志 2022 年 38卷 6期
