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目的 探讨一氧化氮合酶1 (NOS1)在宫颈癌干细胞(CCSCs)中的表达水平,并分析NOS1对CCSCs顺铂(Cisplatin,DDP)化疗敏感性的影响及作用机制.方法 qRT-PCR检测NOS1在宫颈癌细胞系HeLa、Siha、Caski及人正常宫颈上皮细胞系Hucec中的表达水平.选择高表达NOS1的宫颈癌细胞培养CCSCs.Western blot检测肿瘤干细胞(CSCs)中Nanog、SOX2、OCT4干性标志蛋白及NOS1的表达.MTS检测宫颈癌细胞和CCSCs对DDP的IC50值.对照siRNA和NOS1 siRNA (si-NOS1)转染CCSCs分为NC组和si-NOS1组,MTS检测两组CCSCs对DDP的IC50值.DDP处理NC组和si-NOS1组CCSCs后流式细胞仪实验检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中ABCG蛋白和凋亡相关蛋白的表达.结果 qRT-PCR结果显示NOS1在宫颈癌细胞系中的表达高于在人正常宫颈上皮细胞系Hucec中的表达水平,在HeLa细胞中表达最高(P<0.05).OCT4、Nanog、SOX2干细胞标志物NOS1在CSCs中表达上调(P<0.05).MTS检测发现与HeLa细胞相比,CCSCs细胞对DDP的IC50值增加(P<0.05).MTS检测发现与NC组相比,si-NOS1组CCSCs细胞对DDP的IC50值降低(P<0.05).DDP处理CCSCs后,与NC组相比,si-NOS1组细胞凋亡率增加,细胞中ABCG2和Bcl-2表达降低,Bax蛋白表达增加(P<0.05).结论 NOS1在CCSCs中表达增加,NOS1可能通过上调ABCG2调

作者:杨燕丽;李富娟;牛宁

来源:西部医学 2020 年 32卷 9期

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作者:
杨燕丽;李富娟;牛宁
来源:
西部医学 2020 年 32卷 9期
标签:
宫颈癌 肿瘤干细胞 一氧化氮合酶1 顺铂 化疗敏感性
目的 探讨一氧化氮合酶1 (NOS1)在宫颈癌干细胞(CCSCs)中的表达水平,并分析NOS1对CCSCs顺铂(Cisplatin,DDP)化疗敏感性的影响及作用机制.方法 qRT-PCR检测NOS1在宫颈癌细胞系HeLa、Siha、Caski及人正常宫颈上皮细胞系Hucec中的表达水平.选择高表达NOS1的宫颈癌细胞培养CCSCs.Western blot检测肿瘤干细胞(CSCs)中Nanog、SOX2、OCT4干性标志蛋白及NOS1的表达.MTS检测宫颈癌细胞和CCSCs对DDP的IC50值.对照siRNA和NOS1 siRNA (si-NOS1)转染CCSCs分为NC组和si-NOS1组,MTS检测两组CCSCs对DDP的IC50值.DDP处理NC组和si-NOS1组CCSCs后流式细胞仪实验检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中ABCG蛋白和凋亡相关蛋白的表达.结果 qRT-PCR结果显示NOS1在宫颈癌细胞系中的表达高于在人正常宫颈上皮细胞系Hucec中的表达水平,在HeLa细胞中表达最高(P<0.05).OCT4、Nanog、SOX2干细胞标志物NOS1在CSCs中表达上调(P<0.05).MTS检测发现与HeLa细胞相比,CCSCs细胞对DDP的IC50值增加(P<0.05).MTS检测发现与NC组相比,si-NOS1组CCSCs细胞对DDP的IC50值降低(P<0.05).DDP处理CCSCs后,与NC组相比,si-NOS1组细胞凋亡率增加,细胞中ABCG2和Bcl-2表达降低,Bax蛋白表达增加(P<0.05).结论 NOS1在CCSCs中表达增加,NOS1可能通过上调ABCG2调