目的 观察内质网应激和自噬反应对葫芦素E(CuE)诱导人结肠癌细胞系HT-29凋亡的作用.方法 采用0.001、0.01、0.1、1、10μmol/L的CuE分别处理培养的HT-29细胞24、48及72 h,对照组仅用DMEM培养液.Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞分析法检测细胞凋亡,蛋白免疫印迹法检测内质网应激相关蛋白CHOP、Grp78以及自噬相关蛋白Beclin1、LC3表达水平.结果 Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞分析结果表明,随着CuE浓度升高,作用时间延长,凋亡细胞占总细胞比例明显升高(P＜0.05),呈时间与剂量依赖性.蛋白印迹分析结果显示,用CuE处理HT-29细胞24 h后,与对照组相比,内质网应激相关蛋白CHOP及Grp78蛋白表达明显升高(P＜0.05),自噬相关蛋白Beclin1表达逐渐增(P＞0.05),胞浆型LC3(LC3-Ⅰ)发生酶解,转变为自噬体膜型LC3-Ⅱ,且LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值大小呈现出先上升(P＜0.05)后下降(P＞0.05)的趋势.结论 内质网应激和自噬反应参与介导了CuE引起的人结肠癌细胞HT-29凋亡,其可能是CuE诱导结肠癌细胞凋亡的重要途径.
作者：随何欢；赵海霞；朱丽莎；唐春梅；梁婧；苏强
来源：西部医学 2020 年 32卷 11期
