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报道了一种粘性末端的限制性酶切片段的直接克隆和测序的方法.对限制性酶切片段的粘性末端先用T4 DNA聚合酶处理,变为平末端,然后用TaqTM DNA聚合酶在其3′末端加上A腺苷,即可利用T/A克隆载体进行直接克隆测序.利用这种简单而快速的方法,对2个RFLP探针Psr680的限制性酶切片段(1.65 kb和0.65 kb)进行了测序,表明这种方法可以替代利用相应载体进行相应酶切等处理的粘性末端连接克隆测序的方法.

作者:胡银岗;MEREDITH Carter;MICHAEL G K Jones

来源:西北植物学报 2003 年 23卷 6期

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作者:
胡银岗;MEREDITH Carter;MICHAEL G K Jones
来源:
西北植物学报 2003 年 23卷 6期
标签:
限制性片段 克隆测序 TA法克隆 restricted fragments cloning and sequencing TA-cloning
报道了一种粘性末端的限制性酶切片段的直接克隆和测序的方法.对限制性酶切片段的粘性末端先用T4 DNA聚合酶处理,变为平末端,然后用TaqTM DNA聚合酶在其3′末端加上A腺苷,即可利用T/A克隆载体进行直接克隆测序.利用这种简单而快速的方法,对2个RFLP探针Psr680的限制性酶切片段(1.65 kb和0.65 kb)进行了测序,表明这种方法可以替代利用相应载体进行相应酶切等处理的粘性末端连接克隆测序的方法.