为了探究盐生植物的耐盐机制,比较不同盐生植物超氧化物歧化酶(SOD)基因耐盐性的大小,采用RACE技术克隆了盐角草锰和铜/锌两种SOD的cDNA全长.序列分析表明,盐角草MnSOD基因(SeMSD,GenBank登录号为JQ061158)含有699 bp的开放阅读框,编码一个长233个氨基酸的多肽,其预测相对分子量为25.7 kD.Cu/ZnSOD基因(SeCSD,GenBank登录号为JQ061160)开放阅读框长为684 bp,并编码228个氨基酸的多肽,相对分子量为23.3 kD.根据已获得的这两个cDNA序列和GenBank公布的盐芥MnSOD基因序列(ThMSD,EF140719),构建了3个原核表达载体pET30a-SeMSD、pET30a-SeCSD和pET30a-ThMSD,并将它们转化大肠杆菌BL21,成功表达出了目的蛋白.通过优化IPTG的诱导浓度,在6.5％和7.5％盐度下对这3个SOD基因的耐盐能力验证结果显示,相比对照菌BL21 (pET30a),转化了pET30a-SeMSD和pET30a-ThMSD载体的重组菌具有更高的耐盐性,而转化pET30a-SeCSD载体的重组菌没有表现出耐盐性的提高.
作者：吴凡；余梅；鲁茂龙；李娟；王荣富；王先磊
来源：西北植物学报 2012 年 32卷 10期
