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以甘蓝型纯系油菜为试材,用RT-PCR和RACE方法首次从油菜种子中获得油菜热激转录因子的cDNA全长序列,命名为BnHSFA4a,GenBank登录号为HQ435241.结果表明:该cDNA长l 667 bp,编码1个具有389aa的蛋白质,该基因编码的氨基酸序列与拟南芥热激转录因子AtHSFA4a编码的氨基酸序列间相似度为82%.对34条编码不同热激转录因子的氨基酸序列进行多重比对,结果在100~190 aa处序列间氨基酸总相似性超过60%,显示出较高的保守性.构建原核表达载体并成功表达出预期蛋白.半定量RT-PCR结果显示,该基因的表达先于油菜肌醇半乳糖苷合成酶(BnGOLS1)基因,符合该基因调控BnGOLS1的假设.推测AtHSFA4a基因可能通过调控BnGOLS1的表达量进而在油菜种子脱水耐性获得过程中发挥一定的作用.

作者:沈久源;李煦;汪晓峰

来源:西北植物学报 2013 年 33卷 4期

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作者:
沈久源;李煦;汪晓峰
来源:
西北植物学报 2013 年 33卷 4期
标签:
甘蓝型油菜 BnHSFA4a 基因克隆 基因表达分析
以甘蓝型纯系油菜为试材,用RT-PCR和RACE方法首次从油菜种子中获得油菜热激转录因子的cDNA全长序列,命名为BnHSFA4a,GenBank登录号为HQ435241.结果表明:该cDNA长l 667 bp,编码1个具有389aa的蛋白质,该基因编码的氨基酸序列与拟南芥热激转录因子AtHSFA4a编码的氨基酸序列间相似度为82%.对34条编码不同热激转录因子的氨基酸序列进行多重比对,结果在100~190 aa处序列间氨基酸总相似性超过60%,显示出较高的保守性.构建原核表达载体并成功表达出预期蛋白.半定量RT-PCR结果显示,该基因的表达先于油菜肌醇半乳糖苷合成酶(BnGOLS1)基因,符合该基因调控BnGOLS1的假设.推测AtHSFA4a基因可能通过调控BnGOLS1的表达量进而在油菜种子脱水耐性获得过程中发挥一定的作用.