以‘徐稻4号’为材料,构建OsCaMs的瞬时表达载体,利用生物信息学和RT-PCR方法设计OsCaMs定量引物5个,鉴定参与ABA诱导的OsCaMs基因并分析其生理功能,为进一步揭示ABA信号转导核心组分的研究奠定基础.结果显示:(1)水稻OsCaMs的5个家族基因的CDS等长,均为450 bp,ABA(100 μmol·L-1)处理能够明显诱导OsCaM1-1和OsCaM1-2的表达.(2)利用瞬时表达载体将表达荧光蛋白的OsCaM1-1-YFP和OsCaM1-2-YFP通过PEG方法转化到原生质体中,激光共聚焦分析显示,这2个基因均定位于细胞核、细胞质和细胞膜中;并构建了OsCaM1-1和OsCaM1-2的干扰载体dsOsCaM1-1和dsOsCaM1 2.(3)经ABA诱导的水稻原生质体抗氧化保护酶APX和SOD活性分别显著提高35％和31％;原生质体瞬时表达和瞬时沉默体系分析表明,Os Ca M1-1和OsCaM1-2均能够影响抗氧化保护酶APX和SOD的活性,其中原生质体中瞬时过表达这2个基因对APX和SOD活性上调达到1.15～1.45倍,瞬时干扰这2个基因对APX和SOD活性下调达到25％～30％.(4)外源H2O2(10 mmol·L-1)预处理水稻幼苗可诱导OsCa M1-1和OsCaM1-2基因表达量上调,并且OsCaM1-2能够诱导水稻原生质体中H2O2的积累.(5)原生质体瞬时表达分析发现,在水稻原生质体中瞬时表达OsCaM1-1和OsCaM1-2可分别诱导OsrbohB和OsrbohE的表达;而

作者：李闻博；蔡翔；蒋明义

来源：西北植物学报 2017 年 37卷 8期