bHLH(Basic helix-loop-helix,bHLH)转录因子家族是植物最大的转录因子家族之一,广泛参与植物生长发育和盐胁迫应答机制.该研究利用同源克隆的方法克隆蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)的MtbHLH148基因,采用qRT-PCR方法分析MtbHLH148基因在蒺藜苜蓿中的表达特性,构建超表达载体并通过农杆菌侵染法转化拟南芥(A rabidopsis thaliana),对转基因拟南芥的耐盐性相关功能进行分析研究.结果显示:(1)从蒺藜苜蓿中获得MtbHLH148基因,该基因cDNA全长1343 bp,包含开放阅读框为603 bp,编码201个氨基酸,蛋白分子量22.7 kD,等电点为11.76;蛋白结构分析显示,该蛋白无跨膜结构域,无信号肽,为亲水性蛋白;含有精氨酸/赖氨酸残基的保守结构域和典型的bHL H结构域;二级结构以 α-螺旋和无规则卷曲为主.(2)亚细胞定位表明,MtbHLH148蛋白定位在细胞核.(3)进化树分析表明,MtbHLH148与大豆(Glycine max)的亲缘性最近;启动子分析发现,该基因启动子区域含有光响应元件、MYB结合位点以及ABA应答元件ABRE,可能参与非生物胁迫.(4)qRT-PCR分析发现,MtbHLH148基因在蒺藜苜蓿的茎中表达量最高,叶中表达量最低,且MtbHLH148基因受ABA(100μmol/L)诱导并在盐胁迫(200 mmol/L NaCl)处理8 h内表达量上调,而在低温(4℃)处理时表达量明显下调.(5)

作者：王菊萍；王珍；张铁军；龙瑞才；杨青川；康俊梅

来源：西北植物学报 2019 年 39卷 6期