目的:利用RNAi技术抑制宫颈癌HeLa细胞株Survivin基因,观察HeLa细胞株的细胞凋亡率、survivin蛋白表达及对顺铂(DDP)药物敏感性的变化.方法:以培养的宫颈癌HeLa细胞株为体外研究模型,设脂质体组、对照组、RNAi组进行实验.(1)半定量RT-PCR,Western blot法检测Survivin mRNA、蛋白在各组细胞中的表达;(2)用流式细胞术分析各组细胞周期及细胞凋亡率的影响;(3)用MTT法分析DDP对各组细胞存活率作用的浓度.结果:(1)RT-PCR检测结果显示,Survivin扩增条带(206bp)的亮度差异显著,RNAi组明显弱于脂质体组及对照组.RNAi组Survivin mRNA相对含量较质脂体组明显下降,差异有统计学意义(P＜0.01);Western blot检测各实验组Survivin蛋白的表达,脂质体组与对照组Survivin蛋白条带明显存在,且基本一致,而RNAi组同样位置的条带基本消失;(2)RNAi组细胞阻滞在G0/G1期,G/M期减少,与脂质体组和对照组分别比较,差异有统计学意义(P＜0.01);(3)MTT比色法检测结果显示,不同浓度顺铂处理后脂质体组、对照组、RNAi组的IC50分别为(0.298±0.035)、(0.147±0.031)、(0.012±0.001),RNAi组HeLa细胞对顺铂的药物敏感性增高.两者相比差异有统计学意义(P=0.000).结论:RNAi明显抑制了Survivin在转录及翻译水平的表达;RNAi抑制Survivin基因表达

作者：薛芳；张爱荣；于华鹏

来源：现代妇产科进展 2006 年 15卷 11期