目的:研究微小RNA-16(miR-16)在人上皮性卵巢癌顺铂耐药细胞中的表达及其与顺铂耐药的关系.方法:脂质体lipofectamine2000介导miR-16成熟体模拟物(mimics)及阴性对照片段(NC)分别转染人卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP.实时荧光定量PCR检测各组细胞中miR-16的表达；蛋白印迹法检测细胞中Bcl-2蛋白、c-myc蛋白的表达；四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞的顺铂半数抑制浓度(IC50)；caspase-3活性检测试剂盒检测细胞内caspase-3酶的活性；流式细胞仪检测细胞的凋亡率.结果:(1)SKOV3/DDP细胞顺铂耐药指数(RI)为5.33；(2)SKOV3/DDP细胞中miR-16表达水平明显低于SKOV3细胞,约为后者的1/10(P=0.000),转染miR-16 mimics后SKOV3/DDP 细胞中miR-16水平升高约660倍(P=0.001)；(3)SKOV3/DDP细胞Bcl-2、c-myc蛋白的相对表达量较SKOV3细胞明显升高,转染miR-16 mimics后SKOV3/DDP细胞Bcl-2、cmyc蛋白的相对表达量明显降低(P＜0.01)；(4)SKOV3/DDP细胞转染miR-16 mimics 后,顺铂IC50(14.19±0.06)较转染NC组(22.52±0.60)明显降低(P=0.002),且顺铂作用后caspase-3的酶活力单位也明显升高(P=0.000)；(5)顺铂(20μg/ml)作用24h、48h 后,SKOV3组凋亡率明显高于SKOV3/DDP纽,转染miR-16 mimics的SKOV3/DDP细胞凋亡率约为转染NC

作者：唐蕊；崔竹梅；娄艳辉；李岩；姚如永

来源：现代妇产科进展 2012 年 21卷 7期