目的:通过小干扰RNA(siRNA)载体介导抑制肽基脯氨酰同分异构酶(Pin1)表达,探讨Pin1对宫颈癌细胞SiHa增殖与凋亡的影响.方法:构建pGPU6/GFP/Neo-Pin1 siRNA表达载体,脂质体介导将其转染至宫颈癌细胞SiHa中;实验设3组:实验组(SiHa/pGPU6-Pin1 siRNA组)、阴性对照组(SiHa/pGPU6-con组)和空白对照组(SiHa).采用RT-PCR、Western blot法检测Pin1的表达;MTT法检测细胞增殖活性;原位末端标记法(TUNEL)和流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡.结果:转染SiHa/pGPU6-Pin1siRNA的SiHa细胞中,Pin1 mRNA和蛋白表达分别下调68.1％和54.8％,细胞增殖显著抑制.TUNEL显示典型细胞凋亡特征,SiHa/pGPU6-Pin1 siRNA组的凋亡指数(AI)为(29.6±14.58)％,显著高于SiHa/pGPU6-con组[(8.44±5.65)％]和空白对照组[(5.34±4.47)％](P＜0.05).SiHa/pGPU6-Pin1 siRNA组的细胞凋亡率为(30.95±16.47)％,显著高于SiHa/pGPU6-con组[(6.18±6.10)％]和空白对照组[(5.95±4.99)％](P＜0.05).结论:RNA干扰技术能特异高效的抑制Pin1基因的表达,Pin1基因的下调能抑制宫颈癌细胞增殖并促进细胞凋亡,提示Pin1可能成为治疗宫颈癌的新靶点.

作者：钱颖；贺晓琪；蔡惠兰；董卫红；王泽华

来源：现代妇产科进展 2013 年 22卷 10期