目的:研究宫颈癌细胞Siha分泌的外泌体(Exosomes)能否介导上皮-间质转化(EMT),从而改变癌前细胞Ect1的体外侵袭能力.方法:差速超速离心法分离Siha-Exo,透射电镜观察形态,Western blot检测标志蛋白表达,共聚焦显微镜观察PKH67染色外泌体的生物学活性.Siha-Exo和PBS分别与Ect1共培养48 h后Western blot检测上皮和间质转化标志蛋白的表达,Transwell侵袭实验检测共培养后Ect1体外侵袭能力.结果:Siha-Exo为直径30~100 nm的盘状囊泡,特异性表达标志性蛋白CD63和CD81,能够被受体细胞Ect1内吞,具备生物学活性.Western blot结果显示,与PBS组相比,Siha-Exo组下调Ect1细胞中上皮标志蛋白E-Cadherin和β-Catenin的表达,上调间质标志蛋白N-Cadherin和Vimentin的表达.Transwell侵袭实验显示,与PBS组相比,Siha-Exo组穿透聚碳酯膜的Ect1细胞数明显增多(P=0.01).结论:Siha-Exo能够介导Ect1发生EMT变化,提高其体外侵袭能力.
作者:易红艳;周琛斐;梁莉;王薇;魏文斐;陈晓静;吴湘光;严瑞明;刘国炳;陈春林;钟梅;余艳红
来源:现代妇产科进展 2017 年 26卷 3期