目的:获得高表达 Mint2蛋白的 PC12稳定表达株,观察 Mint2蛋白对 PC12细胞形态的影响,深入研究阿尔茨海默病的发病机制. 方法:用 PCR方法将 Mint2基因亚克隆至真核表达载体 pcDNA3.1A,构建真核表达载体 pcDNA3.1-AMint2;采用脂质体 lipofectamine2000介导,将重组载体转染入 PC12细胞, G418筛选稳定克隆;用 RT-PCR和 Westernblot检测外源基因 Mint2在 PC12细胞中的转录及表达,并观察 Mint2蛋白对 PC12细胞形态的影响. 结果:成功构建了真核表达载体 pcDNA3.1-Mint2;并获得了稳定表达 Mint2蛋白的 PC12- Mint2基因工程细胞株; Mint2对 PC12细胞具有明显的促分化和促胞体增大的神经营养作用. 结论:Mint2可在 PC12细胞中有效表达,目对 PC12细胞形态有明显影响,这为进一步研究 Mint2生物学功能及其作用机制奠定了基础.
作者：魏传银；郑舟军；陈雪红；路长林；王丽梅
来源：中国临床康复 2004 年 8卷 28期
