目的:观察作为组织工程瓣膜种子细胞的隐静脉间质细胞的体外钙化机制.方法:实验于2003-05/2004-08在解放军第四军医大学全军心血管外科研究所实验室完成.分离培养并鉴定犬后肢隐静脉间质细胞,取3～6代细胞,分为钙化组和对照组.钙化组在钙化条件培养液中培养,对照组在标准培养液中培养.15 d后,行von kossa染色、钙沉积、碱性磷酸酶及上清液骨钙素测定.结果:犬隐静脉间质细胞经Ⅷ因子、α-SMA、Venmintin免疫组化染色鉴定,主要有平滑肌细胞、成纤维细胞和肌纤维母细胞组成.培养15 d后,钙化组von kossa染色呈强阳性,对照组呈弱阳性.钙化组钙沉积比对照组高27倍(5.384±0.443,0.192±0.024,P＜0.01),碱性磷酸酶高2.13倍(9.611±0.639,3.069±0.178,P＜0.01),骨钙素于培养第6天开始升高,至第12天到达高峰,然后有轻度下降.结论:体外培养的犬隐静脉间质细胞具有向成骨细胞表型转化的潜能,在钙化条件培养下具有成骨细胞的表型,有明显的钙化现象发生.
作者：宿学家；刘维永；顾春虎；欧阳辉；卫向阳
来源：中国临床康复 2004 年 8卷 33期
