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目的:利用骨形态发生蛋白2腺病毒转染向成骨细胞分化的骨髓基质细胞,在体外观察骨形态发生蛋白2的表达量和反应成骨细胞特性的指标变化.方法:实验于2002-04/12在北京大学第三医院中心实验室进行.6周龄雄性BALB/c小鼠60只用于骨髓基质细胞提取,小鼠骨髓基质细胞分别用Dulbecco改良的Eagle培养基液和骨诱导培养基(含地塞米松10-8mol/L、L-抗坏血酸50 mg/L、β-甘油磷酸钠10 mmol/L Dulbecco改良的Eagle培养基液)培养.①不同量骨形态发生蛋白2腺病毒转染骨髓基质细胞的碱性磷酸酶比活性的比较:取原代培养的骨髓基质细胞,分别加入转染指数25,50,100,200骨形态发生蛋白2腺病毒,以不加骨形态发生蛋白2腺病毒的骨髓基质细胞作为对照.6 d后收集细胞,测定碱性磷酸酶活性.②骨髓基质细胞诱导分化后转染骨形态发生蛋白2腺病毒的碱性磷酸酶比活性的比较:实验分5组:骨髓基质细胞组,用Dulbecco改良的Eagle培养基培养9 d;骨诱导培养3 d组,骨诱导培养3 d改用Dulbecco改良的Eagle培养基培养6 d;骨诱导培养9 d组,骨诱导培养9 d;骨诱导培养3d+骨形态发生蛋白2腺病毒组,骨诱导培养3 d,加入转染指数50的骨形态发生蛋白2腺病毒作用6 d;骨形态发生蛋白2腺病毒组,用Dulbecco改良的Eagle培养基培养3 d,加入同量骨形态发生蛋白2腺病

作者:张志山;马庆军;党耕町

来源:中国临床康复 2005 年 9卷 26期

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张志山;马庆军;党耕町
来源:
中国临床康复 2005 年 9卷 26期
标签:
骨形态发生蛋白质类 重组腺病毒 基因治疗 骨髓基质细胞
目的:利用骨形态发生蛋白2腺病毒转染向成骨细胞分化的骨髓基质细胞,在体外观察骨形态发生蛋白2的表达量和反应成骨细胞特性的指标变化.方法:实验于2002-04/12在北京大学第三医院中心实验室进行.6周龄雄性BALB/c小鼠60只用于骨髓基质细胞提取,小鼠骨髓基质细胞分别用Dulbecco改良的Eagle培养基液和骨诱导培养基(含地塞米松10-8mol/L、L-抗坏血酸50 mg/L、β-甘油磷酸钠10 mmol/L Dulbecco改良的Eagle培养基液)培养.①不同量骨形态发生蛋白2腺病毒转染骨髓基质细胞的碱性磷酸酶比活性的比较:取原代培养的骨髓基质细胞,分别加入转染指数25,50,100,200骨形态发生蛋白2腺病毒,以不加骨形态发生蛋白2腺病毒的骨髓基质细胞作为对照.6 d后收集细胞,测定碱性磷酸酶活性.②骨髓基质细胞诱导分化后转染骨形态发生蛋白2腺病毒的碱性磷酸酶比活性的比较:实验分5组:骨髓基质细胞组,用Dulbecco改良的Eagle培养基培养9 d;骨诱导培养3 d组,骨诱导培养3 d改用Dulbecco改良的Eagle培养基培养6 d;骨诱导培养9 d组,骨诱导培养9 d;骨诱导培养3d+骨形态发生蛋白2腺病毒组,骨诱导培养3 d,加入转染指数50的骨形态发生蛋白2腺病毒作用6 d;骨形态发生蛋白2腺病毒组,用Dulbecco改良的Eagle培养基培养3 d,加入同量骨形态发生蛋白2腺病