目的:观察传统中药苦参的主要成分苦参碱对人肝癌细胞体外增殖、细胞周期及细胞凋亡作用的影响,探讨其对肝癌可能的作用机制.方法:实验于2004-05/2004-11在锦州医学院免疫与病原生物学教研室完成.选用人肝癌细胞株(BEL-7402),分设苦参碱0.5,0.75,1g/L浓度组,阴性对照组和阳性对照组(顺铂组).①苦参碱对人肝癌细胞增殖吵作用的影响:将对数生长期的人肝癌细胞调至5×10 8L-1,按每孔100 μL接种到96孔板内,培养24 h后加入不同浓度(0.5,0.75,1 g/L)的药物,继续培养72 h.采用四甲基偶氮唑盐法最后用酶标仪测A值.实验同时设阴性对照组和阳性对照组(顺铂组),每组设6复孔.②苦参碱对人肝癌细胞周期的影响:将对数生长期的细胞用苦参碱(0.5,1 g/L)处理48 h后,消化并收集细胞,冲液后固定,4℃过夜.次日再冲洗2次,染色,调整细胞浓度至1×109 L-1,流式细胞仪检测,按FACSort软件多正态拟合程序进行曲线拟合分析,计算DNA含量,得出细胞周期(G1、S、G2+M)的百分比.③苦参碱对人肝癌细胞DNA Ladder条带出现的影响:将对数生长期的细胞用苦参碱(0.5 g/L、1 g/L)处理48 h后,消化并收集细胞,调整细胞浓度至1×109L-1,然后按细胞DNA提取试剂盒说明操作,提取细胞DNA,8g/L琼脂糖凝胶电泳,观察有无DNA ladder条带出现. 结果:①苦参碱
作者：金艳书；吴学敏；娄金丽
来源：中国临床康复 2006 年 10卷 3期
