目的:观察氧化低密度脂蛋白对内皮细胞株304细胞释放纤溶酶原激活物抑制剂1及6-酮-前列腺素F1α的影响.方法:实验于2005-06/12在解放军第三零五医院老年病中心实验室完成.内皮细胞株304细胞(由武汉中国生物典藏中心提供).①内皮细胞株304细胞加入DMEM培养基孵育培养,传代时以质量浓度为25 g/L的胰酶消化.显微镜下细胞呈鹅卵石样紧密排列,无重叠生长现象.②将未经修饰的低密度脂蛋白溶于0.15 μmol/L氯化钠溶液中,透析除去残余试剂,4℃条件下储存,以防脂蛋白氧化.③将内皮细胞株304细胞以3x104/孔细胞悬液接种到96孔板中,分为氧化低密度脂蛋白0,50,100,200 mg/L浓度组,每组重复3孔.细胞融合生长后换用含不同浓度的氧化低密度脂蛋白DMEM培养基,作用24 h,留取细胞上清液,检测纤溶酶原激活物抑制剂1及6-酮-前列腺素F1α的含量.④细胞悬液接种到96 孔板后,加入100 mg/L的氧化低密度脂蛋白,分别作用3,6,12,24 h,留取细胞上清液,测定纤溶酶原激活物抑制剂1及6-酮-前列腺素F1α含量,观察氧化低密度脂蛋白时间效应.以氧化低密度脂蛋白0 mg/L浓度组作为空白对照.结果:①氧化低密度脂蛋白对内皮细胞释放纤溶酶原激活物抑制剂1及6-酮-前列腺素F1α含量的影响:与氧化低密度脂蛋白0 mg/L浓度组比较,氧化低密度脂蛋白50,
作者:张清华;赖晓辉;蒋知新
来源:中国组织工程研究与临床康复 2007 年 11卷 6期