目的:观察中药复方制剂消可宁对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞增殖的抑制作用.方法:实验于2004-04/11在南京医科大学第一附属医院内分泌代谢研究中心细胞培养研究室完成.①中药复方制剂消可宁(由制大黄、制附子、生黄芪组成,南京军区南京总医院制剂科生产,药品批号:院临(2003)第01017号,规格为90 mL/袋).大鼠系膜细胞株HBZY-1购自武汉大学中周典型培养物保藏中心.②将购入的系膜细胞株消化培养,取培养4~8代的细胞,吸去培养瓶中的上清液,消化离心后混匀,锥虫蓝染色观察细胞活性.③不同刺激时间系膜细胞增殖实验设立3组,正常糖浓度组每孔加入5.6 mmol/L葡萄糖溶液200 μL,高糖对照组每孔加入30 mmol/L葡萄糖溶液200 μL,高糖+消可宁组每孔加入30 mmol/L葡萄糖与0.06 g/mL消可宁混合液200 μL,6孔/组.各组分别于培养24,48,72 h后向板孔中加5 g/L的4-甲基偶氮四唑蓝20 μL,于酶标仪492 nm波长处检测吸光度值.④不同浓度消可宁刺激高糖环境下系膜细胞增殖实验设立7组,高糖对照组每孔加入30 mmol/L葡萄糖溶液200 μL,消可宁20,40,60,80,120,200 g/L组每孔加入30 mmol/L葡萄糖+对应浓度的消可宁混合液200 μL,6孔/组.培养72 h后各组向板孔中加5 g/L的4-甲基偶氮四唑蓝20 μL,同法检测吸光度值.结果:①系膜细胞
作者:魏群利;陆晓和;汤淏;刘翠萍;刘超
来源:中国组织工程研究与临床康复 2007 年 11卷 12期