目的:观察呼吸道合胞病毒感染肺上皮细胞A549后Toll样受体3表达的变化,探讨Toll样受体3介导呼吸道合胞病毒感染肺上皮细胞的炎性反应及其介导的信号转导通路.方法:实验于2006-05/12在安徽医科大学基础医学院分子生物学实验室完成.用呼吸道合胞病毒感染体外培养的A549细胞,于感染后4,8,16,24 h收集细胞和细胞培养上清.用Trizol提取细胞总RNA,RT-PCR法检测TOLL样受体3mRNA、肿瘤坏死因子α mRNA表达的变化;提取细胞总蛋白和核蛋白,免疫印迹法分别检测TOLL样受体3蛋白、核内活性核因子κB的变化;用ELISA检测细胞培养上清肿瘤坏死因子α的表达.以未感染病毒的细胞为正常对照组.结果:①呼吸道合胞病毒感染A549细胞后,Toll样受体3和肿瘤坏死因子α的mRNA和蛋白的表达量均升高且有时间依赖性,Toll样受体3 mRNA 24 h表达量是基础表达量的5倍多,肿瘤坏死因子α mRNA 24 h表达量是基础表达量的3倍多.②A549细胞中核内活性核因子κB有基础表达,经由呼吸道合胞病毒感染,核内活性核因子κB随感染时间的延长升高;同时呼吸道合胞病毒感染能促进Toll样受体3蛋白的表达,高于正常对照组(P＜0.01).③呼吸道合胞病毒感染能促进A549细胞分泌肿瘤坏死因子α,感染24 h分泌达到高峰.结论:呼吸道合胞病毒感染A549细胞后上调Toll样
作者：云云；黄升海
来源：中国组织工程研究与临床康复 2007 年 11卷 21期
