背景:以往研究发现,冲击波可通过激活有丝分裂原激活蛋白激酶p38(p38MAPK),增强CD3和CD28激活的T细胞增殖和分泌白细胞介素2.目的:观察细胞内的ATP向外释放,是否为冲击波增强T细胞功能的潜在机制.设计:以细胞为观察对象,分组对照重复测量观察.单位:吉林大学第一医院骨科研究室.材料:KDE-2001体外冲击波碎石机(北京中科建安医疗技术公司制造).MAPKp38抑制剂:SB203580 1 mg(BioSource Inc.,Camarillo,CA);检测磷酸化的p38MAPK试剂盒(Cell Signaling Tehchmology,Inc.U.S.A.);P2受体抑制剂:suramin 50 mg(BIOMOL Research Laboratories Inc,PA),用1.749 2 mL的IMDM培养基将50 mg的suramin配成0.02 mol/L的溶液.ATP酶:apyrase 200 U(Sigma,U.S.A.);P2X7受体阻滞剂:KN-62(BioSource Inc.,Camarillo,CA);p38 MAPK抑制剂:SB203580 1 mg(BioSource Inc.,USA*542 Flynn Roas,Camarillo,CA);检测ATP的生物荧光试剂盒/ATP Bioluminescence Assay Kit CLS Ⅱ(Roche Diagnostics GmbH,Mannheim,Germany).方法:实验于2005-01/2006-12在吉林大学第一医院骨科研究室完成.①采用体外冲击波碎石机(工作电压7 kV、电容0.3μF时,冲击波正相压强23 MPa,能量密度0.18 mJ/mm2)作用于T细胞,冲击波作用50~400次.②用特异性的ATP试
作者:于铁成;赵毅;陈玮伦;金安;刘建国
来源:中国组织工程研究与临床康复 2007 年 11卷 31期