背景:目前神经干细胞的定向分化是神经干细胞研究的热点.脑源性神经生长因子作为诱导剂可否诱导神经干细胞分化为神经元.目的:观察在表皮生长因子培养条件下,不同质量浓度脑源性神经生长因子对成年大鼠海马神经干细胞向神经元分化的影响.设计:对比实验.单位:中国医科大学人体解剖学教研室.材料:实验于2007-08在中国医科大学神经解剖研究室完成.提取成年SD大鼠海马神经干细胞,无血清技术培养.清洁级成年SD大鼠3只,体质量200～250 g,由中国医科大学实验动物部提供,实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准.实验过程中应用的表皮生长因子、脑源性神经生长因子均由R&D公司提供.方法:①无菌条件下分离大鼠海马组织,用含碱性成纤维生长因子、表皮生长因子、B27的无血清细胞培养技术体外培养神经干细胞.②取第4代神经干细胞,利用有限稀释法进行单细胞克隆培养.将单细胞克隆传代后的克隆球细胞进行神经干细胞的鉴定.克隆球细胞行巢蛋白免疫细胞化学染色,诱导分化1周后进行神经元特异性烯醇化酶、胶质纤维酸性蛋白免疫细胞化学染色.③单细胞克隆的神经干细胞脑源性神经生长因子诱导分化实验,根据脑源性神经生长因子质量浓度不同分成0 μg/L浓度的对照组和50、100、150、200μg/L浓度的4个实验组,各组的培养液中
作者：王振宇；佟雷；季丽莉；赵久红；唐源远
来源：中国组织工程研究与临床康复 2008 年 12卷 16期
