目的:构建人白细胞介素18受体IL-18Rα,β真核表达载体pcDNA3.1-zeocin/IL-18R α pcDNA3.0/IL-18R β,并将pcDNA3.0/IL-18R β稳定转染293细胞,构建IL-18R β稳定表达细胞株,用于建立IL-18信号转导的体外细胞模型.方法:实验于2006-06/2007-05在北京大学医学部免疫系实验室完成.扩增并克隆人IL-18R α和IL-18R β cDNA,构建真核表达载体pcDNA3.1-zeocin/IL-18R α,pcDNA3.0/IL-18R β.将pcDNA3.0/IL-18R β转染293细胞,经G418筛选建立起稳定表达IL-18R β的细胞株,Western-blot方法检测稳定细胞株IL-18R β的表达,挑选表达较高的细胞转染IL-18Rv,通过NF-к B依赖的Luciferase检测IL-18信号转导通路的建立.结果:成功构建了IL-18R α和IL-18Rβ的真核表达载体,ID-18Rβ的基因稳定转染到了293细胞中并获得了表达,通过瞬时转染IL-18Rα真核表达载体,在293细胞中建立了IL-18信号转导的体外细胞模型.结论:成功建立起了IL-18诱导NF-к B活化的体外细胞模型,为进一步研究IL-18信号转导途径奠定了基础.
作者：陈燕；赵振东
来源：中国组织工程研究与临床康复 2008 年 12卷 28期
