背景:壳聚糖-β-甘油磷酸钠凝胶(Chitosan-disodium β-glycerol phosphate,C/GP)与软骨细胞显示了良好的相容性,因此假设作为组织工程的种子细胞--骨髓间充质干细胞也与C/GP凝胶有较好的细胞相容性.目的:观察骨髓间充质干细胞在C/GP凝胶中生长、增殖和成软骨分化,探讨C/GP凝胶与骨髓间充质干细胞的细胞相容性,为软骨组织工程材料寻找新的适宜细胞载体.设计、时间及地点:完全随机对照,细胞组织工程实验,于2005-10/2006-05在解放军第三军医大学西南医院中心实验审完成.材料:成年雌性小型猪6只用于收集骨髓,培养骨髓间充质干细胞.方法:取培养后传至第3代的骨髓间充质干细胞用于实验.在成骨培养条件下检测骨髓间充质干细胞碱性磷酸酶活性和钙沉积,在成软骨培养条件下行甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫组织化学检测.壳聚糖盐酸溶液与β-甘油磷酸钠溶液混匀后,置37℃孵箱?-10 min即形成壳聚糖-β-甘油磷酸钠凝胶.成软骨培养3周,倒置显微镜观察骨髓间充质干细胞在C/GP凝胶内黏附及成活情况,组织免疫组织化学法分析骨髓间充质干细胞在凝胶内成软骨分化情况,MTT法检测骨髓间充质干细胞种植2,5和8 d后增埴情况.主要观察指标:①猪骨髓间充质干细胞的特征.②骨髓间充质干细胞在C/GP内的黏附和成活.③骨髓间充质干细胞在C
作者:李忠;杨柳;戴刚;王富友;金旭红;段小军
来源:中国组织工程研究与临床康复 2008 年 12卷 45期