背景:滑膜血管翳形成后可分泌一系列酶如基质金属蛋白酶等,可促进血管新生和炎症反应,形成软骨和骨的破坏.目的:研究重组腺病毒介导的基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP1)基因对类风湿关节炎模型大鼠关节炎症及滑膜血管新生的影响.设计、时间及地点:基因治疗动物体内实验,于2005-07/2007-06在扬州大学完成.材料:HEK-293A细胞系购于中科院上海细胞生物研究所细胞库,ECV-304细胞为自备,带有绿色荧光蛋白(GFP)基因或/和基质金属蛋白酶组织抑制因子1基因的重组腺病毒(rAD-GFP-TIMP1及tAD-GFP)的病毒贮存液由南京师范大学分子医学实验室惠赠.清洁级4～6周龄SD大鼠40只.方法:将rAD-GFP-TIMP1和rAD-GFP扩增、纯化,用紫外分光光度法检测重组腺病毒的颗粒数.用rAD-GFP-TIMP1感染ECV-304细胞检测病毒活力.30只大鼠注射II型胶原建立类风湿关节炎大鼠模型,分为:①模型组注射PBS.②模型+rAD-GFP-TIMP1组注射rAD-GFP-TIMP1.③模型+RAD-GFP组注射rAD-GFP,均为膝关节腔内注射;10只大鼠注射生理盐水造模做对照组.1次/周,4周.主要观察指标:①rAD-GFP-TIMP1及rAD-GFP在HEK-293A细胞中扩增、纯化后病毒的颗粒数及GFP蛋白表达.②各组大鼠每周进行1次关节炎指数评分.③于造模第4周处死大鼠取膝关节行滑膜病理免疫组织化学染色及
作者：张育；刘晓华；顾健；沈维干；孟德钎；李国青
来源：中国组织工程研究与临床康复 2009 年 13卷 41期
