背景:好的肾脏近端小管上皮细胞原代培养方法能够为药物筛选、机制研究等提供模型基础.目的:探索小鼠肾脏近端小管上皮细胞原代培养的最佳处理条件,并对其进行尿酸吸收功能测试.方法:无菌取小鼠肾脏,去除外膜及脂肪组织,切取近端皮质部分,机械破碎,Ⅰ型胶原酶消化,依次过50目,100目筛网过滤,Percoll密度梯度离心法分离肾小管节段,接种至一次性细胞培养瓶.制备细胞爬片,SP法染色鉴定细胞.在1 500 μmol/L尿酸浓度下,以不同浓度梯度的丙磺舒和苯溴马隆作为指示药物,检测细胞尿酸吸收及作为药物作用体外模型功能.结果与结论:经机械破碎的肾脏近端皮质组织在400 U胶原酶处理20 min时,肾小管节段贴壁率达到最高为54.5
作者:臧路平;吴新荣
来源:中国组织工程研究与临床康复 2010 年 14卷 50期