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背景:目前,制备DNA 分子量标准的方法主要有2 种,一种是用限制性内切酶消化某种DNA,另一种是利用PCR 扩增,2 种方法各有优缺点.在前期采用PCR 技术在前期扩增100~500 bp 片段的基础上,实验室又成功扩增出600~1 000 bp片段,PCR 产物经过纯化,混匀,制备的DNA Ladder,结果制备DNA Ladder 的条带清晰,易于识别,可完全与公司商品化的DNA Ladder 相比,完全可用于分子生物学实验.目的:利用PCR 扩增技术制备DNA 分子量标准参照物.方法:自行构建了一种特殊适宜扩增的质粒pUC-DNA,根据pUC-DNA 的基因序列,利用primer5.0 设计能特异扩增100~1 000 bp 的PCR 引物.PCR 扩增出100~1 000 bp 大小的DNA 片段,在2

作者:王俐;董卫华;张俊河;王天云

来源:中国组织工程研究与临床康复 2011 年 15卷 24期

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作者:
王俐;董卫华;张俊河;王天云
来源:
中国组织工程研究与临床康复 2011 年 15卷 24期
标签:
DNA分子量标准参照物 PCR 凝胶电泳 pUC-DNA PCR回收产物
背景:目前,制备DNA 分子量标准的方法主要有2 种,一种是用限制性内切酶消化某种DNA,另一种是利用PCR 扩增,2 种方法各有优缺点.在前期采用PCR 技术在前期扩增100~500 bp 片段的基础上,实验室又成功扩增出600~1 000 bp片段,PCR 产物经过纯化,混匀,制备的DNA Ladder,结果制备DNA Ladder 的条带清晰,易于识别,可完全与公司商品化的DNA Ladder 相比,完全可用于分子生物学实验.目的:利用PCR 扩增技术制备DNA 分子量标准参照物.方法:自行构建了一种特殊适宜扩增的质粒pUC-DNA,根据pUC-DNA 的基因序列,利用primer5.0 设计能特异扩增100~1 000 bp 的PCR 引物.PCR 扩增出100~1 000 bp 大小的DNA 片段,在2