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背景:移行上皮细胞的分离方法有酶消化法、组织块法及刮削法3种.目的:探讨培养人类膀胱移行上皮细胞和其传代的最佳方法.方法:培养人类膀胱移行上皮细胞,观察细胞在MEM-F12和KSFM培养基中的生长增殖以及形态变化.免疫荧光染色观察上皮细胞特异性蛋白标记AE1及仅在尿路上皮组织中特异表达的尿空斑蛋白Uroplakin III,以鉴定膀胱移行上皮细胞.分别利用4步胰蛋白酶消化法和组织块再植法对细胞进行传代培养.结果与结论:①细胞在MEM-F12培养基中较KSFM培养基中爬出及融合均快,生长状态良好.②细胞免疫荧光鉴定证实为移行上皮细胞.③胰蛋白酶消化传代细胞,传代第18~24 h贴壁,贴壁后无法继续生长,60~72 h后细胞开始凋亡;组织块再种传代细胞生长稳定迅速,24~48 h细胞开始爬出,第10~16天达到80

作者:郝维平;姚友生;王家伟;邓毕华;吕夷松

来源:中国组织工程研究与临床康复 2011 年 15卷 50期

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作者:
郝维平;姚友生;王家伟;邓毕华;吕夷松
来源:
中国组织工程研究与临床康复 2011 年 15卷 50期
标签:
膀胱 上皮细胞 培养基 细胞培养 组织
背景:移行上皮细胞的分离方法有酶消化法、组织块法及刮削法3种.目的:探讨培养人类膀胱移行上皮细胞和其传代的最佳方法.方法:培养人类膀胱移行上皮细胞,观察细胞在MEM-F12和KSFM培养基中的生长增殖以及形态变化.免疫荧光染色观察上皮细胞特异性蛋白标记AE1及仅在尿路上皮组织中特异表达的尿空斑蛋白Uroplakin III,以鉴定膀胱移行上皮细胞.分别利用4步胰蛋白酶消化法和组织块再植法对细胞进行传代培养.结果与结论:①细胞在MEM-F12培养基中较KSFM培养基中爬出及融合均快,生长状态良好.②细胞免疫荧光鉴定证实为移行上皮细胞.③胰蛋白酶消化传代细胞,传代第18~24 h贴壁,贴壁后无法继续生长,60~72 h后细胞开始凋亡;组织块再种传代细胞生长稳定迅速,24~48 h细胞开始爬出,第10~16天达到80