背景:深入准确地研究骨髓间充质干细胞在体内外增殖、分化的规律,寻找安全、有效、灵敏度高、特异性强、简便的标记活细胞的方法至关重要.目的:探索5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷标记骨髓间充质干细胞的有效性及对其增殖能力的影响.方法:全骨髓贴壁法培养扩增SD大鼠骨髓间充质干细胞至第3代.将细胞以5×107 L-1浓度接种于96孔板中,掺入法加入终浓度为0,10,20,50 μmol/L 5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷,分别在培养24,48和72 h检测5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷标记细胞的阳性率、标记后的细胞形态,并绘制标记细胞的生长曲线.结果与结论:各浓度组标记率均随标记时间延长而升高(P < 0.05);各时间点标记率随标记浓度的升高而增加,但其差别无显著性意义(P > 0.05).10 μmol/L 5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶标记骨髓间充质干细胞72 h即可获得良好的标记率.标记前后各组间充质干细胞生长曲线均呈"S"形.说明在实验浓度范围内应用5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷体外标记骨髓间充质干细胞有效,不影响细胞的增殖,且10 μmol/L 5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷标记骨髓间充质干细胞72 h即可获得良好的标记率.
作者:史贵秀;孙丽华;张跃新
来源:中国组织工程研究 2012 年 16卷 1期